猪链球菌2型05ZYH33菌株具有N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性蛋白的鉴定及功能研究

作者：陈平; 刘冉; 黄萌萌; 朱金鲁; 谢芳; 倪宏波; 刘思国^*; 张跃灵^*

来源：中国预防兽医学报, 2019, 41(05): 462-467.

• 猪链球菌2型
• N-乙酰氨基葡萄糖苷酶
• SSU05＿0630
• 基因缺失
• 同工酶

为了研究猪链球菌2型(SS2) 05ZYH33菌株是否具有N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)及同工酶,本研究通过同源蛋白比对,发现05ZYH33菌株表面蛋白SSU050630 C端Ss GH20结构域与肺炎链球菌(S.pneumoniae)的NAG Str H的GH20-1结构域具有60%的同源性;经基因克隆、蛋白表达及纯化后的酶活性分析表明Ss GH20具有NAG活性,且其活力为371 U/mg蛋白;其最适反应温度为50℃、最适p H为5.5;其Km值为0.69。通过构建SS2 ssu050630基因缺失株及全菌酶活性测定,显示SS2 05ZYH33菌株具有NAG活性,而ssu050630基因缺失后的菌株则失去了NAG活性,表明SSU050630是SS2 05ZYH33菌株唯一具有NAG活性的蛋白。本研究为进一步探究Ss GH20在SS2致病中的作用及SS2逃避宿主免疫反应的机制奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 黑龙江八一农垦大学; 动物科技学院; 兽医生物技术国家重点实验室