鸡OATP1B3互作蛋白筛选及其相关基因的转录表达分析

作者：陈友波; 叶涛; 余欢; 石钰仕; 赵德鹏; 龙霞; 谭启松; 李辉^*

来源：南方农业学报, 2023, 1-18.

• 赤水乌骨鸡
• SLCO1B3
• 互作蛋白
• 免疫共沉淀(Co-IP)
• 表达调控

【目的】为探究OATP1B3相互作用的细胞蛋白对鸡蛋绿壳颜色形成的影响，进一步丰富鸡蛋绿壳性状的分子理论研究内容。【方法】将重组真核表达载体pEGFP-SLCO1B3和空载体pEGFP-C1分别转染绿壳型赤水乌骨鸡蛋壳腺上皮细胞，利用Co-IP筛选出与鸡OATP1B3相互作用的细胞蛋白质，通过GO注释、KEGG通路分析、蛋白质相互作用网络分析、结合基因的功能分析，筛选出FXR1、RPS17、CTTN、RPL12蛋白可能与鸡蛋的绿壳性状有较密切关系。一方面，通过构建SLCO1B3基因沉默表达载体，将SLCO1B3基因过表达载体和沉默载体分别转染到赤水乌骨鸡蛋壳腺上皮细胞中，检测当SLCO1B3基因在过表达或沉默时，FXR1、RPS17、CTTN、RPL12 基因在蛋壳腺上皮细胞中的表达情况。另一方面，根据鸡蛋的蛋壳颜色，将赤水乌骨鸡分为白壳、浅绿、深绿3种类型，利用qPCR分别检测FXR1、RPS17、CTTN、RPL12基因在3种类型赤水乌骨鸡蛋壳腺、肝脏、下丘脑组织中的表达情况，将蛋壳颜色测定值与FXR1、RPS17、CTTN、RPL12基因的表达量进行关联分析。【结果】通过质谱鉴定到鸡OATP1B3的37个互作蛋白，这些蛋白主要参与细胞过程、生物调节和能量代谢，具有蛋白结合能力、结构分子活性；蛋壳腺上皮细胞内SLCO1B3基因与FXR1、RPL12、RPS17、CTTN基因间存在调控关系；非绿壳型赤水乌骨鸡下丘脑组织中FXR1基因的表达量极显著高于绿壳型的赤水乌骨鸡，FXR1基因在下丘脑中的表达量与蛋壳颜色△a*值极显著正相关。【结论】FXR1基因在鸡蛋绿壳性状的形成过程中发挥重要作用，FXR1、RPS17、CTTN、RPL12基因在赤水乌骨鸡不同组织中的表达研究，丰富了这些基因的组织表达谱，为SLCO1B3基因的功能及鸡蛋绿壳性状的形成研究进一步提供了新的信息。

• 单位
  贵州大学; 动物科学学院