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摘要
利用基因工程技术在大肠杆菌BL21(DE3)中表达白喉毒素无毒突变体CRM197,经变性条件下亲和纯化后,作为蛋白载体与流感抗原M2e经BMPH偶联,制备CRM197-M2e结合物,用其免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA法测定血清中M2e特异性IgG抗体.结果表明,重组CRM197在大肠杆菌中成功表达,优化后蛋白表达量约为250±30 mg/L,纯度达95%以上;所制CRM197-M2e结合物可有效免疫BALB/c小鼠,其刺激产生的M2e特异性IgG抗体滴度分别是健康组、M2e免疫对照组、CRM197免疫对照组及CRM197+M2e混合组的430.5,32,181和215倍.
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单位生化工程国家重点实验室; 中国科学院过程工程研究所; 四川大学
