摘要
目的研究蛋白酶体抑制对体外培养的星形胶质细胞(AS)IL-6分泌的影响。方法SD乳鼠皮层AS原代培养,并纯化鉴定;不同浓度(0.1,1,2.5,5μM)的蛋白酶体抑制剂(lactacystin)对第二代AS进行短期(24h)急性处理,另一批同期的AS应用较低浓度(0.5μM)的lactacystin长期(4周)慢性处理,应用RT-PCR及ELISA方法检测ASIL-6mRNA的表达和培养基中IL-6蛋白的分泌水平。结果纯化传代的皮层AS经GFAP免疫荧光鉴定,其阳性率可达99.45%;短期抑制组中,1,2.5,5μM蛋白酶体抑制剂可诱导ASIL-6mRNA表达和蛋白分泌增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);长期抑制组中IL-6mRNA表达及蛋白分泌也较同期对照组增加,差异有统计学意义。结论一定程度蛋白酶体活性抑制可诱导培养的ASIL-6mRNA表达及蛋白分泌增加,提示蛋白酶体功能障碍后可能通过诱导AS分泌IL-6增加来参与阿尔茨海默病的病理改变。
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单位神经内科; 华中科技大学同济医学院附属同济医院