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摘要
为了研究无血清分离培养的兔脂肪间充质干细胞(adipose mesenchymal stem cells, AD-MSCs)的生物学特性，建立无血清分离培养AD-MSCs体系，本试验通过采集兔腹股沟处脂肪组织，使用酶消化法分离得到兔AD-MSCs。将兔AD-MSCs进行无血清培养，观察细胞形态和增殖能力，绘制出P3、P6代细胞的生长曲线，通过生长曲线计算细胞群体倍增时间。通过PCR验证MSCs表面标记基因表达情况，以及通过体外诱导分化鉴定兔AD-MSCs的分化能力。结果显示，无血清分离培养的兔AD-MSCs原代细胞形态呈多边形，P3代细胞形态呈长梭型，增殖能力随传代次数增加而下降，在P3、P6代的细胞群体倍增时间分别为18.22, 21.76 h;经过PCR验证发现，细胞表达CD90、CD105和CD73特异性目的片段，但不表达CD34和CD45;在体外诱导条件下，兔AD-MSCs能够分化为脂肪细胞和软骨细胞。结果表明，使用无血清完全培养基分离培养MSCs可为动物细胞治疗提供稳定的细胞来源。
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