丙型肝炎病毒1b基因型C区氨基酸70替代对干扰素刺激应答元件的影响

作者：胡中杰; 刘颖; 仇丽霞; 范作鹏; 聂巍; 梁珊; 于红卫; 金荣华

来源：医学研究杂志, 2014, 43(07): 75-79.

• 丙型肝炎病毒
• 核心蛋白
• 干扰素刺激应答元件
• 干扰素刺激基因

目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C Virus,HCV)1b基因型(genotype 1b,GT-1b)C区氨基酸(amino acid,aa)70替代对干扰素刺激应答元件(interferon-stimulated response element,ISRE)的影响。方法首先构建HCV GT-1b C区aa70野生型和变异型核心蛋白表达质粒,测序鉴定后瞬时转染肝瘤细胞系Huh7细胞,Western blot法鉴定HCV核心蛋白的成功表达;然后利用ISRE双荧光素酶报告基因实验检测核心蛋白表达对ISRE活化的影响,并以SYBR Green real-time PCR检测3种主要干扰素刺激基因(interferon stimulated genes,ISGs)的表达情况。结果构建了HCV aa70野生型和变异型核心蛋白表达质粒,并在体外培养细胞中成功表达。但野生型和变异型核心蛋白表达对ISRE活化及3种主要ISGs表达的影响无明显差异。结论单纯R70Q/H变异的核心蛋白似乎并不足以直接导致IFNα耐药。

• 单位
  首都医科大学附属北京佑安医院