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摘要
目的 掌握西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌核酸多位点序列分型、聚类情况和致病性。方法 对实验室已分离鉴定的14株肠出血性大肠杆菌采用分子生物学和动物实验的方法，进行多位点序列分型鉴定及聚类分析，动物实验后挑选致病性最强菌株进行生长曲线测定和半数致死量(LD50)计算，HE染色制作组织病理切片。结果 14株牦牛源肠出血性大肠杆菌中共出现了3种ST型，分别为ST 33、ST 226、ST 446,各ST型中西藏阿里菌株占比最多为57%(8/14);各ST型中ST 33占比最多为57%(8/14),其次是ST 226占比14%(2/14)该型菌株的致病性最强，ST 446占比最少为7%(1/14)。此外，还有3株占比22%(3/14)未定型肠出血性大肠杆菌。MLST聚类分析表明管家基因在不同ST型中携带等位基因的数量不同，ST 33型中Mdh 22个最多，ST 446型中icd 26个最多，ST 226型中Fumc 27个最多。14株菌株攻毒80只小鼠表现出不同程度的致病性，其中ST 226型致病性最强。将致死小鼠解剖后发现肠上皮出血水肿，脾脏、肝脏有淤血等病理变化。14株菌株中的阿里株(TBY 7)是ST 226型其致病性最强，其生长曲线显示14 h达最大生长数，浓度为1×1011 cfu/mL;60只小鼠差浓度梯度攻毒试验计算出该菌的LD50为2.4×107 cfu/mL。阿里株(TBY 7) ST 226型感染小鼠后经HE染色制作组织病理切片后，结果显示小鼠的十二指肠、盲肠、结肠和直肠黏膜上皮坏死脱落，盲肠肠壁内可见寄生虫，空肠、回肠绒毛结构坏死萎缩、固有层充血；肝细胞轻微空泡变性，脾脏红髓轻微淤血。结论 西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌存在不同ST型，且各地区均有分布；不同ST型的致病性与携带等位基因数量相关，且主要引起肠组织病变，提示相关部门应加强对该致病菌的宣传。
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单位动物科学学院; 西藏农牧学院
