电泳与质谱技术联用鉴定牛乳酪蛋白分子酶法脱磷酸化修饰

作者：王园园; 程英华; 刘大松; 胡锦华; 周鹏

来源：食品与发酵工业, 2015, 41(04): 1-5.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201504001

• β-酪蛋白
• 酪蛋白酸钠
• 去磷酸化
• 电泳
• 质谱

牛乳酪蛋白的磷酸化程度对酪蛋白的结构、功能和营养特性等有着重要的影响。为了从分子水平上模拟人乳组成,选用合适的方法修饰调控牛乳酪蛋白磷酸化程度,并且准确检测其磷酸化程度的变化至关重要。该研究使用马铃薯酸性磷酸酶(PAP)对β-酪蛋白和酪蛋白酸钠脱磷酸化修饰,并分别运用SDS-PAGE、UreaPAGE和质谱技术联用鉴定酶法脱磷酸化修饰后蛋白中磷酸化程度的变化。实验结果表明,采用SDS-PAGE可以观测到α-、β-酪蛋白和蛋白水解情况,但不能区分不同程度脱磷酸化的酪蛋白。Urea-PAGE能较为清晰地表示不同程度脱磷酸化的酪蛋白,但不能准确鉴定不同程度脱磷酸化酪蛋白所含的磷酸基团的个数。LC-MS不仅可以清晰地表示酪蛋白脱磷酸化程度,还可以定量分析不同程度脱磷酸化酪蛋白所含的磷酸基团的个数。

• 单位
  食品科学与技术国家重点实验室; 江南大学