摘要
目的研究贝伐珠单抗对H2O2诱导的视网膜色素上皮细胞凋亡及PTEN/AKT信号通路的影响。方法 ARPE-19细胞分为空白组(正常DMEM培养液培养)、模型组(200μmol·L-1 H2O2)、低剂量实验组(200μmol·L-1 H2O2+0.125 mg·mL-1贝伐珠单抗)、高剂量实验组(200μmol·L-1 H2O2+1.25 mg·mL-1贝伐珠单抗)、SF1670组(200μmol·L-1 H2O2+2μmol·L-1 SF1670)、SF1670+高剂量实验组(200μmol·L-1H2O2+2μmol·L-1SF1670+1.25 mg·mL-1贝伐珠单抗)。以CCK-8法检测细胞ARPE-19存活率,以流式细胞术检测ARPE-19细胞凋亡率,以DCFH-DA荧光探针法检测细胞中活性氧(ROS)水平,检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,以蛋白质印迹法检测ARPE-19细胞凋亡相关及PTEN/AKT信号通路相关蛋白的表达情况。结果给药24 h,空白组、模型组和低、高剂量实验组ARPE-19细胞存活率分别为(98.79±3.57)%,(52.36±2.14)%,(76.74±3.72)%,(91.23±2.19)%;凋亡率分别为(3.64±0.52)%,(15.47±3.15)%,(9.14±1.77)%,(6.82±0.69)%;给药24 h,模型组、SF1670组、SF1670+高剂量实验组ARPE-19细胞存活率分别为(53.95±4.12)%,(80.14±2.95)%,(96.12±1.92)%;凋亡率分别为(16.31±2.66)%,(10.96±1.94)%,(5.58±2.38)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。各组ROS荧光强度、SOD活性、MDA含量、Bax和Bcl-2蛋白相对表达量,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论贝伐珠单抗可明显减少H2O2诱导的视网膜色素上皮细胞活力的损伤和细胞凋亡,其作用机制可能与促进PTEN/AKT信号通路相关蛋白转导有关。
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单位宁波市眼科医院