人红细胞内核苷二磷酸激酶的酶学特性及动力学研究

作者：杨春晓; 师少军; 沈如飞; 周嘉黎; 罗小梅; 张玉; 刘亚妮

来源：药物分析杂志, 2018, 38(03): 385-392.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2018.03.03

• 嘌呤类药物
• 人红细胞
• 核苷二磷酸激酶
• 酶学动力学
• 药物不良反应

目的:探讨人红细胞(RBC)内核苷二磷酸激酶(NDPK)的酶学动力学特性。方法:利用NDPK催化反应底物二磷酸脱氧腺苷、三磷酸脱氧鸟苷生成三磷酸脱氧腺苷及二磷酸脱氧鸟苷(dADP+dGTP?dATP+dGDP)的酶促反应,通过改变反应温度、热处理温度、pH条件、底物浓度及抑制剂浓度进行NDPK酶学动力学研究。结果:底物动力学研究中,Linewever-Burk双倒数图为两组平行直线。产物抑制动力学研究中,固定反应底物dGTP浓度并改变dADP浓度时,dATP表现为非竞争性抑制作用,固定反应底物dADP浓度并改变dGTP浓度时,dATP表现为竞争性抑制作用。反应遵循乒乓机制。文中实验条件下,NDPK酶促反应最大速度Vmax约为110μmol·min-1·g-1,KmdADP=1.26 mmol·L-1,KmdGTP=1.94 mmol·L-1。dATP抑制常数Ki约为0.340.67 mmol·L-1。结论:NDPK为酶促反应dADP+dGT dAPT+dGDP的一种高亲和性催化酶。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院; 第三军医大学新桥医院