穴位埋线调控NOD样受体热蛋白结构域3/半胱氨酸蛋白酶-1信号通路抗溃疡性结肠炎损伤的机制研究

作者：谢超群; 陈凯; 孙豪娴; 董慧; 朱莹^*

来源：针刺研究, 2023, 48(07): 625-634.

DOI：10.13702/j.1000-0607.20220333

• 溃疡性结肠炎
• 穴位埋线
• NOD样受体热蛋白结构域3/半胱氨酸蛋白酶-1信号通路
• 凋亡相关斑点样蛋白
• 炎性反应

目的:观察穴位埋线对“虚、瘀”状态下溃疡性结肠炎(UC)大鼠的治疗作用及对NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)信号通路的调控作用，探讨穴位埋线治疗UC的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组10只和造模组48只，采用腺嘌呤、番泻叶分阶段灌胃，再予2,4,6-三硝基苯磺酸与乙醇复合物灌肠复制“虚、瘀”状态下UC大鼠模型。造模成功的大鼠按体质量随机分为模型组、柳氮磺胺吡啶(SASP)组、非穴位埋线组和穴位埋线组，每组11只。穴位埋线组选“足三里”“天枢”“肾俞”等穴进行穴位埋线治疗，非穴位埋线组于大鼠臀部肌肉丰厚处进行埋线治疗，每14 d治疗1次，共治疗3次；SASP组予SASP溶液(50 mg·kg-1·d-1)灌胃，每日1次，共治疗42 d。观察大鼠一般情况，计算大鼠疾病活动指数(DAI);测量各组大鼠结肠长度；肉眼评估结肠黏膜大体病理学改变，并进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分；HE染色评估结肠组织病理学改变，进行结肠病理损伤(TDI)评分；ELISA法检测各组大鼠血清NLRP3、白细胞介素(IL)-1β和IL-18含量；荧光定量PCR法检测各组大鼠结肠组织NLRP3、Caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、IL-1β及IL-18 mRNA水平；Western blot法检测各组大鼠结肠组织NLRP3、Caspase-1蛋白表达水平；免疫组织化学染色法检测结肠组织ASC阳性表达。结果:与空白组比较，模型组大鼠体质量降低(P<0.01),结肠长度明显缩短(P<0.01),结肠黏膜形成明显溃疡面，隐窝破坏明显，大量炎性细胞浸润，DAI、CMDI及TDI评分升高(P<0.01),血清中NLRP3、IL-1β及IL-18含量升高(P<0.01),结肠组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA水平和Caspase-1、ASC、NLRP3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组比较，穴位埋线组和SASP组体质量升高(P<0.01),大鼠结肠长度增长(P<0.01),结肠黏膜病理损伤明显减轻，DAI、CMDI及TDI评分显著降低(P<0.01),血清中NLRP3、IL-1β及IL-18含量显著降低(P<0.01),结肠组织内NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA和Caspase-1、ASC、NLRP3蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。穴位埋线组各指标较非穴位埋线组均有明显改善(P<0.01)。结论:穴位埋线可通过调控NLRP3/Caspase-1信号通路抑制炎性小体活化，缓解UC大鼠的炎性反应。

• 单位
  湖南中医药大学第一附属医院