miR-125b通过靶向抑制Bak1表达影响人髓系白血病细胞增殖的机制研究及意义

作者：苗玉迪; 焦红霞; 李庆瑞

来源：实用癌症杂志, 2019, 34(07): 1045-1049.

• miR-125b
• Bak1
• 髓系白血病
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的探讨miR-125b通过靶向抑制Bak1表达影响人髓系白血病(AML)细胞增殖的机制及意义。方法选择miR-125b mimics、miR-125b inhibitor、miR-125b NC分别转染人AML细胞株THP-1(miR-125b mimics组、miR-125b inhibitor组、NC组)。采用荧光定量PCR检测miR-125b mRNA相对表达量,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western-blot法检测蛋白表达水平,利用生物信息学分析和荧光素酶双报告系统明确miR-125b的下游靶基因。结果miR-125b mimics转染后THP-1细胞中miR-125b表达水平显著上调(P <0. 05),miR-125b inhibitor转染后细胞中miR-125b水平则显著降低(P <0. 05)。转染24 h、48 h后,MTT法检测显示miR-125b mimics组的细胞增殖活性显著低于miR-125b inhibitor组与NC组(P <0. 05),细胞凋亡率显著高于miR-125b inhibitor组与NC组(P <0. 05),后两组对比差异无统计学意义(P> 0. 05)。转染48 h后,Western-blot法检测显示miR-125b mimics组的Bak1蛋白表达水平显著高于miR-125b inhibitor组与NC组(P <0. 05),三组PI3K、AKT蛋白表达水平对比差异无统计学意义(P> 0. 05)。在HEK293细胞株中,miR-125b mimic转染48 h后可以显著降低Bak1萤火虫荧光素酶活性(P <0. 05),而对于含有突变型载体的Bak1萤火虫荧光素酶活性无显著影响(P> 0. 05)。结论过表达miR-125b可通过靶向抑制Bak1的活性,抑制人AML细胞株的增殖活性,促进细胞凋亡。

• 单位
  陕西省人民医院; 陕西省肿瘤医院