利用卵胞浆精子注射(ICSI)技术生产转基因小鼠

作者：李明; 严阿勇; 姚慧; 安晓荣; 苟克勉

来源：生物工程学报, 2006, (05): 784-788.

DOI：10.13345/j.cjb.2006.05.015

• ICSI
• 囊胚
• 小鼠
• 转基因
• Southern blot mouse
• intracytoplasmic sperm injection
• blastocyst
• transgenic
• Southern blot

在掌握小鼠ICSI技术的基础上,进行了ICSI技术生产转基因小鼠的研究。来自成年KM小鼠附睾尾的精子,使用未加抗冻剂的HEPES-CZB溶液,在液氮中冻融1次后,用于本实验。解冻精子与DNA混匀1min后,精子头被显微注射到B6D2F1小鼠成熟卵母细胞质中。精子头与pEGFP-N1环状DNA共注射生产的ICSI受精卵,在CZB溶液中培养至囊胚期时,39.1%(9/23)的囊胚表达GFP基因。精子注射后6h,直接移植ICSI受精卵后,7只妊娠受体一共产仔30只,效率为23.8%(30/126)。Southernblot分析其中16只小鼠发现,3只(18.8%)转基因小鼠同时整合了GFP和Neom...

• 单位
  农业生物技术国家重点实验室; 中国农业大学