MMP-26基因siRNA真核表达载体的构建及鉴定

作者:张扬; 王建伟; 蔺勇; 房学迅; 李才
来源:中国实验诊断学, 2006, 10(10): 1135-1137.
DOI:10.3969/j.issn.1007-4287.2006.10.009

摘要

目的构建基质金属蛋白酶-26(MMP-26)小干扰RNA(siRNA)表达质粒,以研究其对人肿瘤细胞MMP-26基因表达的沉默效果,探索肿瘤基因治疗的新途径。方法根据MMP-26基因mRNA序列,设计有小发夹结构的3条寡核苷酸序列,克隆到空载体pSUPERIOR.puro中,构建重组质粒,同时设计构建分别针对GFP和-βactin的干扰质粒作为阴性对照和阳性对照,并进行酶切鉴定和测序分析。结果酶切及测序证实重组质粒构建成功。结论利用RNA干扰(RNAi)技术可成功构建siRNA表达载体。

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