牛支原体黏附宿主细胞间接免疫荧光检测方法的建立

作者：李明霞; 陈胜利^*; 郝华芳; 赵萍; 季文恒; 王展慧; 刘永生; 殷宏; 储岳峰^*

来源：中国兽医学报, 2018, 38(07): 1310-1345.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2018.07.09

• 牛支原体
• 黏附
• MDBK细胞
• 间接免疫荧光

牛支原体可引起牛肺炎、乳腺炎和关节炎等多系统炎症,关于其黏附宿主细胞的机理有待深入研究。本试验以牛支原体08M株和牛肾细胞MDBK为研究对象,抗牛支原体多克隆抗体为一抗,FITC标记的兔抗牛IgG为二抗,通过优化牛支原体黏附滴度、黏附时间及一抗、二抗工作浓度,建立牛支原体黏附宿主细胞的间接免疫荧光检测方法。最终确定牛支原体的最适黏附滴度为1×109 CFU/mL,黏附时间为4h,一抗最适工作浓度为1∶250,二抗最适工作浓度为1∶250。本试验建立的间接免疫荧光方法可用于牛支原体黏附宿主细胞的检测,为牛支原体体外感染的检测及黏附机理的研究提供有效的技术手段。

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所