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摘要
本试验旨在探究大麻二酚(CBD)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠乳腺上皮细胞氧化损伤的保护作用及其分子机制。以小鼠乳腺上皮细胞系HC11作为培养细胞。利用MTT法筛选CBD的最佳作用浓度，最终选择2、4、6μmol/L CBD作为后续试验的作用浓度。分别用1μg/mL LPS单独处理，2、4、6μmol/L CBD与1μg/mL LPS共处理HC11细胞，并设不进行药物处理的对照组，处理24 h后分别检测氧化应激相关指标、抗氧化相关基因mRNA和蛋白表达的变化。结果显示：1)与对照组相比，1μg/mL LPS处理后HC11细胞内活性氧(ROS)大量生成，丙二醛(MDA)含量显著增加(P<0.05);与LPS组相比，2、4、6μmol/L CBD预处理后HC11细胞内ROS含量明显下降，MDA含量显著降低(P<0.05),其中以6μmol/L CBD的效果最为显著。2)与对照组相比，1μg/mL LPS处理后HC11细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)均极显著降低(P<0.01)。与LPS组相比，2μmol/L CBD预处理显著或极显著提高HC11细胞内SOD活性和T-AOC(P<0.05或P<0.01),而GSH-Px活性则无显著变化(P>0.05);4、6μmol/L CBD预处理则均能极显著提高HC11细胞内GSH-Px、SOD活性和T-AOC(P<0.01)。3)与对照组相比，1μg/mL LPS处理后HC11细胞内转录因子E2相关因子2(Nrf2)、NAD(P)H醌氧化还原酶1(NQO1)、血红素加氧酶-1(HO-1)和超氧化物歧化酶1(SOD1)的mRNA相对表达量均显著或极显著下调(P<0.05或P<0.01);加入不同浓度CBD与LPS共处理时，与LPS组相比，Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1的mRNA相对表达量均极显著上调(P<0.01)。4)与对照组相比，1μg/mL LPS处理后HC11细胞内Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1的蛋白相对表达量显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01);加入不同浓度CBD与LPS共处理时，与LPS组相比，Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1的蛋白相对表达量显著或极显著上调(P<0.05或P<0.01)。综上所述，在LPS诱导的小鼠乳腺上皮细胞氧化损伤模型中，适宜浓度的CBD可以通过激活Nrf2信号通路促进抗氧化酶HO-1、NQO1和SOD1的表达，清除细胞内过多的ROS和MDA,从而对LPS诱导的细胞氧化损伤起到保护作用。
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