大熊猫RPL35A基因的克隆及超表达研究

作者：杜玉杰; 侯万儒^*

来源：西华师范大学学报(自然科学版), 2018, 39(04): 377-382.

DOI：10.16246/j.issn.1673-5072.2018.04.007

• 大熊猫
• RT-PCR
• 降落-PCR
• RPL35A
• 克隆
• 表达

探究大熊猫核糖体蛋白基因RPL35A及其编码蛋白的特点,以进一步研究其编码蛋白的功能,为深入开展大熊猫分子生物学研究及大熊猫基因保护等积累科学资料;本研究以大熊猫骨骼肌为材料,采用RT-PCR和降落-PCR方法克隆RPL35A基因的cDNA基因组序列,IPTG法诱导基因在BL21细胞系中的表达;大熊猫RPL35A基因的cDNA序列为337 bp,编码110个氨基酸;该基因的基因组序列长1 275 bp,包含2个外显子和1个内含子;RPL35A基因在BL21细胞系中的表达产物与组氨酸标签蛋白融合形成18 k Da的融合蛋白;该基因的cDNA序列、基因组序列中的外显子片段及其编码的蛋白序列与已报道的人、牛、小家鼠、褐家鼠等物种的对应序列同源性很高,蛋白质理化性质和功能位点基本相同,这说明该基因及其编码蛋白在进化过程中非常保守,可用于分子进化方面的研究,在物种进化关系研究中具有一定的参考意义和研究价值;同时,该基因可在原核生物中表达出具有活性的产物,可进一步开展纯化和蛋白质功能的研究。

• 单位
  湛江幼儿师范专科学校; 西华师范大学