摘要

马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种(Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefiranofaciens)是我国2021年批准的新食品原料,该菌种在食品、药品及化妆品领域具有广阔的应用前景。为了能够快速特异性检测马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种,本研究建立了一种特异性实时荧光定量PCR的检测方法。根据模式菌株马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种ZW3的16S rDNA序列和全基因组序列设计筛选特异性引物,采用SYBR Green Ⅰ荧光染料建立实时荧光定量PCR方法,并对方法的特异性、灵敏度、重复性和混合体系等进行检测。结果表明,本研究所建立的方法特异性强,灵敏度高,重复性好,建立实时荧光定量PCR的标准曲线,其线性相关系数R2为0.965,具有良好的线性关系,且在马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种及混合体系中可以特异性检出。综上,本研究建立的实时荧光定量PCR法可以快速、准确地检测马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种,为马乳酒样乳杆菌的特异性定性定量检测提供了一种新的方法。