环介导等温扩增与实时荧光定量PCR检测布鲁氏菌的比较

作者：刘玉梅; 古丽扎尔·阿不都纳斯尔; 丁剑冰; 马秀敏

来源：中国病原生物学杂志, 2016, 11(12): 1070-1073.

DOI：10.13350/j.cjpb.161204

• 布鲁氏菌
• 环介导等温扩增
• Real-time PCR
• OMP31基因

目的为快速、特异、灵敏的检测和鉴定布鲁氏菌,本研究依据环介导等温扩增技术与实时荧光定量PCR技术原理设计引物,建立两种检测布鲁氏菌的方法并进行评价。方法根据布鲁氏菌OMP31基因序列设计6条LAMP引物和2条Real-time PCR引物,对新疆医科大学第一附属医院院确诊的10例布鲁氏菌病患者全血标本进行DNA检测。LAMP反应前加入羟基萘芬蓝(HNB)作为扩增指示剂,根据指示剂的颜色变化判定结果,并比较两种方法的特异性及灵敏度差异。结果 LAMP反应只需3060min完成,在检测特异性和灵敏度方面两者结果相同,均能检出100个拷贝数的质粒DNA,且均无假阳性。结论 LAMP方法快速、简便,经济,无需专用仪器设备,更适用于基层医院对布鲁氏菌的快速检测。

• 单位
  新疆医科大学; 新疆医科大学第一附属医院; 基础医学院