多西他赛对头颈鳞癌细胞焦亡的影响及作用机制探讨

作者：高嘉敏; 姚艳丽; 王玉珏; 张志愿^*; 孙树洋^*

来源：中国口腔颌面外科杂志, 2023, 21(02): 105-111.

DOI：10.19438/j.cjoms.2023.02.001

• 多西他赛
• 头颈鳞癌
• 细胞焦亡
• Caspase-3
• GSDME

目的 ：探讨多西他赛对头颈鳞癌细胞焦亡的影响及分子机制。方法 ：用对照组（0μmol/L）和不同浓度多西他赛（0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L）处理头颈鳞癌细胞CAL33及SCC154，采用活细胞工作站监测细胞焦亡形态变化。利用蛋白免疫印迹法（Western blot, WB）检测Gasdermin-E(GSDME)、GSDME-N端、Caspase-3及Caspase-3剪切蛋白的蛋白表达；借助活细胞Caspase-3活性与Annexin V细胞凋亡检测试剂盒检测活细胞中Caspase-3活性；采用活性氧（reactive oxygen species,ROS）检测试剂盒检测细胞内ROS水平。使用ROS抑制剂乙酰半胱氨酸抑制细胞ROS的产生，进一步利用WB检测对照组（0μmol/L）、2.5μmol/L多西他赛添加5 mmol/L乙酰半胱氨酸处理组、2.5μmol/L多西他赛不添加乙酰半胱氨酸处理组及5 mmol/L乙酰半胱氨酸不添加多西他赛组处理组内GSDME及GSDME-N端剪切蛋白的蛋白表达，观察ROS抑制对焦亡通路的影响。采用SAS 9.4软件包对数据进行统计学分析。结果：与对照组相比，多西他赛诱导CAL33及SCC154产生细胞溶胀崩解，胞膜表面出现气泡样凸起的焦亡表型；促进Caspase-3活性；显著上调GSDME-N端及Caspase-3剪切蛋白的蛋白表达量（P<0.05）；诱导ROS水平增加。乙酰半胱氨酸显著降低多西他赛诱导后头颈鳞癌细胞的GSDME-N端蛋白表达量（P<0.05）。结论：多西他赛可能激活ROS/Caspase-3/GSDME通路，诱导头颈鳞癌细胞焦亡。

• 单位
  上海交通大学; 上海市口腔医学研究所; 上海交通大学医学院附属第九人民医院