AJUBA调控MST1 YAP1和TAZ因子促进食管鳞状细胞癌细胞体外增殖迁移和侵袭

作者：苏丽萍; 季敏; 路子扬; 刘丽; 王维娜; 苗娜; 张巍; 蒲红伟^*

来源：中国肿瘤临床, 2022, 49(07): 331-337.

DOI：10.12354/j.issn.1000-8179.2022.20211829

• 食管鳞状细胞癌
• AJUBA蛋白
• Hippo信号通路
• 增殖
• 侵袭

目的：探讨AJUBA在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）细胞中表达以及是否通过调控MST1、YAP1和TAZ因子影响细胞增殖、侵袭和迁移。方法：采用Western blot法检测AJUBA蛋白在食管癌细胞系KYSE30、KYSE150与KYSE450中的表达水平，构建shRNA干扰载体AJUBA转染至KYSE150食管癌细胞系；通过体外克隆形成实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell实验探究AJUBA对KYSE150细胞的增殖、周期、迁移和侵袭能力的影响。采用RT-PCR和Western blot检测MST1、YAP1和TAZ mRNA和蛋白的表达；核质分离实验检测AJUBA、YAP1和TAZ蛋白表达情况。结果：稳定干扰AJUBA基因后，平板克隆实验结果显示，与阴性对照组相比，shAJUBA组的细胞克隆形成数量明显减少，差异具有统计学意义（P<0.001）；流式细胞周期实验结果显示，shAJUBA组中的细胞阻滞于G0/G1期，G2/M期与S期细胞显著减少（P<0.05）；划痕实验和Transwell侵袭实验结果显示，与AJUBA空染组相比，shAJUBA组细胞迁移能力和侵袭能力均明显减弱（P<0.001）;RT-PCR与Western blot实验结果显示，shAJUBA组细胞中的MST1、YAP1、TAZmRNA与蛋白表达水平均显著降低，差异具有统计学意义（P<0.05）。核质分离实验结果提示AJUBA蛋白在正常食管鳞状上皮细胞株（SHEE）细胞核中表达，而在KYSE150细胞胞质与胞核中表达；YAP1和TAZ蛋白在SHEE细胞中不表达，在KYSE150细胞质与细胞核中表达，上述结果差异均具有统计学意义（均P<0.05）。结论：AJUBA促进食管癌细胞的增殖、侵袭与迁移，可能与激活MST1、YAP1、TAZ因子的表达而影响食管鳞状细胞癌进展有关。

• 单位
  山东大学齐鲁医院; 基础医学院; 新疆医科大学第一附属医院; 新疆医科大学附属肿瘤医院