牛呼吸道疾病多重荧光PCR（探针法）检测方法的建立及应用

作者：陶攀; 东笑; 罗昌俊; 张桂红; 王贵平; 贾爱卿

来源：中国动物传染病学报, 2023, 1-7.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20230120.002

• 牛呼吸道综合征
• IBRV
• BVDV
• Mb

本实验建立了一种能够同时快速检测牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒和牛支原体的三重荧光PCR。分别以牛传染性鼻气管炎病毒gB基因、牛病毒性腹泻病毒的5’-UTR基因和牛支原体的P48基因为靶基因设计了特异性引物和TaqMan探针，建立了多重实时荧光PCR方法，并对该方法的灵敏度、特异性、重复性等进行了验证，同时对临床样本进行了检测。结果表明，该方法灵敏度高能够检测出低至10个拷贝数的样本、特异性强、重复性好，并且成本低，与其它牛病原体无交叉反应，对临床样本的检测优于国家标准方法。适合大量临床样品的检测和疫情监控，为牛呼吸道疾病的病原微生物鉴定和降低养殖经济损失提供科学可靠的方法。

• 单位
  广东海大畜牧兽医研究院有限公司; 华南农业大学; 广东海大集团股份有限公司畜牧水产研究中心