人足月胎盘滋养细胞的分离纯化与鉴定

作者：王冬菊; 肖小敏; 肖昕

来源：实用儿科临床杂志, 2010, 25(17): 1353-1356.

• 足月妊娠胎盘
• 滋养细胞
• 分离
• 实验方案 term placenta
• trophoblast
• isolation
• protocol

目的建立从人足月胎盘中大量分离纯化滋养细胞的实验方法。方法收取20例正常足月妊娠胎盘,剪取50 g绒毛组织,2.5 g.L-1胰酶联合300 000 U.L-1DNaseⅠ反复消化组织,简化的密度梯度离心法(100 mL.L-1、300 mL.L-1、500 mL.L-1、700 mL.L-1Percoll细胞分离液)联合反复贴壁法分离纯化滋养细胞,锥虫蓝染色计算细胞活力,细胞免疫荧光标记、激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)、流式细胞技术(FCM)检测滋养细胞内细胞角蛋白7(CK-7)的表达,计算滋养细胞纯度,比较2种方法测得的滋养细胞纯度是否有差异;FCM计算细胞数目。结果经胰酶、DNaseⅠ...

• 单位
  暨南大学附属第一医院; 中山大学附属第六医院