Circ＿0032131靶向miR-502-5p/TLR4调控IL-1β诱导的软骨细胞损伤

作者：湛世本^*; 田耕; 陈建平; 王平

来源：免疫学杂志, 2023, 39(01): 36-44.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20230005

• 骨关节炎
• 软骨细胞
• 白细胞介素1β
• 环状RNA circ＿0032131

目的 探讨circ＿0032131对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的人软骨细胞增殖、凋亡和炎症的影响及其潜在分子机制。方法 使用10 ng/ml的IL-1β诱导人软骨细胞C28/I2，模拟骨关节炎的炎症环境；细胞转染建立基因敲低和过表达细胞模型；qRT-PCR检测circ＿0032131、miR-502-5p和TLR4 m RNA的表达，Western blot检测TLR4蛋白表达。采用CCK8实验检测细胞增殖活性，流式细胞仪检测细胞凋亡，酶联免疫吸附实验测定白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。双荧光素酶实验验证circ＿0032131、miR-502-5p和TLR4基因之间的靶向关系。结果 IL-1β诱导人软骨细胞中circ＿0032131表达升高，miR-502-5p表达降低。IL-1β诱导人软骨细胞增殖活性降低、凋亡增加和炎症，诱导细胞损伤，而敲低circ＿0032131能够减轻IL-1β诱导的人软骨细胞损伤。miR-502-5p是circ＿0032131的靶向miRNA，敲低circ＿0032131明显上调miR-502-5p的表达。功能补救实验表明，抑制miR-502-5p能够逆转circ＿0032131敲低对软骨细胞损伤的保护作用。TLR4是miR-502-5p的下游靶基因，miR-502-5p能够负调控TLR4基因表达。过表达miR-502-5p能够减轻IL-1β诱导的人软骨细胞损伤，而过表达TLR4则能逆转miR-502-5p过表达对软骨细胞的保护作用。结论 circ＿0032131在IL-1β诱导的人软骨细胞中高表达，敲低circ＿0032131可能通过靶向调控miR-502-5p/TLR4表达，减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤。

• 单位
  琼海市人民医院