HA基因真核表达载体构建及在293T细胞中的表达

作者：李方琳; 王慧慧; 粟雨芯; 马忠仁^*

来源：甘肃畜牧兽医, 2022, 52(03): 37-40.

DOI：10.15979/j.cnki.cn62-1064/s.2022.03.009

• 血凝素(HA)
• 质粒构建
• 真核表达
• DNA疫苗

目的：为后续进一步研究H1N1病毒DNA疫苗对小鼠免疫系统的影响提供技术支撑。方法：应用PCR方法体外扩增血凝素(HA)基因全序列，并利用pcDNA3.1(+)载体构建甲型流感病毒(H1N1)血凝素(HA)的真核表达质粒(pcDNA3.1 (+)-HA)，经双酶切鉴定后，转染293T细胞，通过RT-PCR和Western blot方法观察该重组质粒在293T细胞中的表达情况。结果表明，pcDNA3.1 (+)-HA重组质粒构建成功；与空白及阴性对照相比，转染293T细胞48 h后的HA mRNA水平显著上升(2.4×103，P<0.000 1)，并能在293T细胞中成功表达，为深入研究H1N1病毒DNA疫苗对小鼠免疫系统的影响奠定了基础。

• 单位
  西北民族大学