绒山羊细菌人工染色体BAC文库构建条件的优化

作者：刘志红; 李宁; 任立明; 胡晓湘; 郭英; 崔文涛; 尹俊; 张文广; 李金泉

来源：中国畜牧兽医, 2009, (10): 55-58.

• 细菌人工染色体
• 文库
• 构建条件 bacterial artificial chromosome
• library
• constructing condition

近年来,细菌人工染色体BAC文库成为应用最广泛的基因组文库之一,它以其容量大、遗传特性稳定、嵌合体少、插入片段易回收、操作简便等不可比拟的优点而被广泛应用于基因组较大的真核生物基因组研究之中。作者就细菌人工染色体BAC文库的构建条件进行了研究,用HindⅢ部分酶切绒山羊基因组,脉冲场凝胶电泳分离大片段DNA,以电洗脱法回收DNA后,与BAC载体连接,将连接产物点透析后,电转化DH10B感受态细胞,最后对转化的片段小提质粒进行NotⅠ酶切,脉冲电泳鉴定其大小。结果表明,本试验采用的方法既可获得较大的插入片段又可获得较高的转化效率,是较好的用于构建大基因组文库的方法。

• 单位
  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所; 内蒙古农业大学; 农业生物技术国家重点实验室; 中国农业大学