摘要

目的 研究Survivin基因沉默对骨肉瘤裸鼠自噬相关蛋白表达水平的影响。方法 重组腺病毒Survivin-shRNA转染骨肉瘤MG-63细胞,以1∶5进行传代,挑选稳定转染的MG-63细胞并扩增,GFP组和CON组为阴性对照组。采用皮下异种移植法构建裸鼠骨肉瘤模型48只,每3天用卡尺测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;Western Blot法和免疫组织化学法分别检测自噬相关蛋白LC3、P62与mTOR的表达。结果 成功构建出裸鼠骨肉瘤模型。骨肉瘤生长曲线显示,与CON和GFP组相比,Survivin-shRNA组肿瘤增长缓慢,表明Survivin-shRNA在体内能抑制骨肉瘤的生长;Western blot结果显示,Survivin-shRNA组中LC3、P62蛋白表达升高,mTOR表达水平降低;免疫组织化学结果显示,Survivin-shRNA组中LC3、P62的表达升高,mTOR蛋白表达降低。结论 Survivin-shRNA可抑制骨肉瘤细胞增殖能力,其机制可能与调节自噬相关蛋白LC3、P62与mTOR的表达有关。