摘要
目的探讨Bcl-2小分子抑制剂ABT-737对人急性髓细胞白血病细胞U937诱导凋亡作用及机制。方法以人急性髓细胞白血病细胞U937为研究对象,观察不同浓度梯度(0、0.625、1.25、2.5、5.0、10μmol/L)ABT-737对U937细胞增殖抑制及诱导凋亡作用,并检测ABT-737作用前后Bcl-2 mRNA水平和蛋白表达水平改变。CCK-8检测细胞生长抑制率,Annexiin-V/PI双染检测细胞凋亡率,RT-PCR方法检测Bcl-2 mRNA水平,Western blot检测Bcl-2蛋白表达。结果 ABT-737可显著抑制U937细胞生长,随着ABT-737浓度(0、0.625、1.25、2.5、5.0、10μmol/L)的增加,U937细胞数量逐渐减少。其中2.5μmol/L ABT-737即可使U937细胞出现明显增殖抑制,作用24 h后其存活率与对照组(0μmol/L)比较差异有统计学意义(P<0.05)。ABT-737可显著诱导U937细胞凋亡,随着ABT-737浓度(0、0.625、1.25、2.5、5.0、10μmol/L)的增加,凋亡率逐渐增加。其中2.5μmol/L ABT-737就能显著诱导U937细胞凋亡,作用24 h后U937细胞凋亡率与对照组(0μmol/L)比较差异有统计学意义(P<0.05)。0、0.625、1.25、2.5、5.0、10μmol/L的ABT-737与U937细胞作用24 h后,U937细胞的Bcl-2 mRNA水平有显著下调作用。0、0.625、1.25、2.5、5.0、10μmol/L的ABT-737与U937细胞作用24 h后,Western blotting结果显示,Bcl-2蛋白表达水平逐渐下降,5.0μmol/L ABT-737作用细胞24 h即可完全抑制Bcl-2蛋白表达。结论 ABT-737可通过抑制Bcl-2蛋白表达而诱导U937细胞凋亡。
- 单位