摘要
目的探讨去甲斑蝥素(Norcantharidin,NCTD)对人黑色素瘤A375细胞周期、ROS自由基及细胞凋亡的影响及其机制。方法培养人A375黑素瘤细胞,分别采用10,20,40μmol/L NCTD预处理,培养48 h后,采用流式细胞术测定NCTD对人A375黑素瘤细胞周期的影响,采用免疫印迹法检测NCTD对人A375黑素瘤细胞蛋白Cyclin D1和P21表达的影响,采用流式细胞术测定NCTD对人A375黑素瘤细胞ROS及凋亡水平的影响。结果 10,20,40μmol/L NCTD组G1期细胞比例高于对照组,S期和G2期细胞比例低于对照组,20,40μmol/L NCTD组G1期细胞比例高于10μmol/L NCTD组,S期和G2期细胞比例低于10μmol/L NCTD组,40μmol/L NCTD组G1期细胞比例高于20μmol/L NCTD组,S期和G2期细胞比例低于20μmol/L NCTD组(P<0.05)。40μmol/L NCTD组处理人A375黑色素瘤细胞48 h后,细胞周期蛋白Cyclin D1、Cyclin A和CDK2低于对照组,P21蛋白高于对照组(P<0.05)。10,20,40μmo/L NCTD组细胞内ROS水平高于对照组,20,40μmol/L NCTD组细胞内ROS水平高于10μmol/L NCTD组,40μmol/L NCTD组细胞内ROS水平高于20μmol/L NCTD组(P<0.05)。10,20,40μmol/L NCTD组细胞凋亡率高于对照组,20,40μmol/L NCTD组细胞凋亡率高于10μmol/L NCTD组,40μmol/L NCTD组细胞凋亡率高于20μmol/L NCTD组(P<0.05)。NAC组细胞凋亡率低于对照组,NCTD组和NAC+NCTD组细胞凋亡率高于对照组,NAC+NCTD组细胞凋亡率低于NCTD组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NCTD通过阻滞细胞G1周期、减少S期抑制人A375黑色素瘤细胞的增殖,通过诱导ROS水平升高诱导细胞凋亡。
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单位河北省儿童医院; 河北医科大学