牙鲆弹状病毒环介导等温扩增检测方法的建立与应用

作者：孙颖杰; 岳志芹; 刘荭; 赵玉然; 史秀杰; 梁成珠; 吴斌; 李叶; 王哲

来源：华中农业大学学报, 2010, (02): 203-207.

DOI：10.13300/j.cnki.hnlkxb.2010.02.025

• 牙鲆弹状病毒
• 环介导等温扩增
• 聚合酶链式反应
• 检测 hirame rhabdovirus(HRV)
• loop-mediated isothermal amplification(LAMP)
• RT-PCR
• detection

建立了牙鲆弹状病毒的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,首先根据牙鲆弹状病毒的糖蛋白的基因保守序列,利用Primer Explorer V3软件设计了6条引物,并对LAMP反应温度和反应时间等条件进行了优化。该方法的检测限为30fgRNA,比常规RT-PCR灵敏度高100倍,与鲤春血症病毒、传染性胰脏坏死病毒、传染性造血器官坏死病毒、海洋双RNA病毒、病毒性出血败血症病毒以及病毒性神经坏死病毒等没有交叉反应。该方法检测时间短,在1h内即可完成检测。用建立的LAMP方法对临床鱼样进行了检测,结果表明40尾石鲽鱼样品中有...

• 单位
  吉林大学; 中华人民共和国山东出入境检验检疫局; 辽宁出入境检验检疫局