牛病毒性呼吸道疾病主要病原多重PCR检测方法的建立与应用

作者：张晓梅; 姜晓霞; 孙晓波; 王以欣; 马莹莹; 乔薪瑗; 徐义刚^*; 贾烁^*

来源：中国兽医科学, 2022, 52(08): 957-963.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0146

• 牛传染性鼻气管炎病毒
• 牛病毒性腹泻病毒
• 牛副流感病毒3型
• 牛呼吸道合胞体病毒
• 多重PCR方法

为建立对牛呼吸道疾病综合征(BRDC)进行快速而准确的病原学检测方法，基于牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)g B 基因、牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 5′UTR 基因、牛副流感病毒 3 型(BPIV3)HN 基因和牛呼吸道合胞体病毒(BRSV) N 基因设计检测引物，经过条件优化，建立了检测 IBRV、BVDV、BPIV3 和 BRSV的多重 PCR 方法。 该方法具有良好的特异性和灵敏性，可特异性地同时检测 IBRV、BPIV3、BRSV 和 BVDV，灵敏度分别为 5.86×103、2.42×103、1.02×104和 5.02×104copies/ μL，且重复性良好。 利用该方法对采集的309 份具有呼吸道症状牛的鼻腔拭子进行检测 ，结果显示 ，IBRV、BVDV、BPIV3 和 BRSV 的阳性率分别为6.15%、28.16%、18.12%和 33.66%，其中 BVDV 与 BRSV 的混合感染率为 5.18%,BVDV 与 BPIV3 的混合感染率为 1.62%,BRSV 与 BPIV3 的混合感染率为 4.21%,BVDV、BRSV 与 BPIV3 的混合感染率为 0.97%。该多重 PCR 方法的建立为 BRDC 主要病毒的鉴别检测及流行病学调查提供了必要的技术支撑。

• 单位
  浙江农林大学; 动物科技学院; 东北农业大学