瘤源性IDO2对黑色素瘤形成及生长的影响

作者：刘燕玲; 徐萍; 徐娜; 陈晓燕; 房春娟; 闵卫平

来源：免疫学杂志, 2018, 34(03): 193-199.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20180029

• 吲哚胺2
• 3-双加氧酶2
• 黑色素瘤
• 稳定转染
• 肿瘤免疫

目的研究B16-BL6细胞内IDO2基因表达对小鼠黑色素瘤生长、发展及抗肿瘤免疫的影响。方法通过G418药物筛选建立稳定细胞系B16-BL6/IDO2+及B16-BL6/IDO2+,q PCR法检测IDO2的表达,MTT实验检测IDO2表达对细胞增殖的影响;然后以构建的稳定细胞在小鼠体内建立肿瘤模型,观察IDO2表达对黑色素瘤形成、生长的影响;最后在处死小鼠后通过流式细胞术检测引流淋巴结内Treg、CD4+/CD8+T细胞百分比及T淋巴细胞凋亡率,LDH法检测肿瘤特异性细胞毒反应来观察肿瘤组织内IDO2表达对引流淋巴结内肿瘤免疫的影响。结果成功建立B16-BL6/IDO2+及B16-BL6/IDO2-稳定细胞系:B16-BL6/IDO2-细胞持续稳定低表达IDO2且不受LPS及IFN-γ的诱导;与B16-BL6/IDO2+细胞相比,B16-BL6/IDO2-细胞在体外增殖速度减慢,体内实验显示其肿瘤生长速度减慢、肿瘤质量减轻;进一步流式细胞术结果发现:引流淋巴结内Treg百分比下降、CD8+T细胞数量增加、T淋巴细胞的凋亡率减少;LDH法检测CD8+细胞特异性特异性杀伤肿瘤细胞反应增强。结论黑色素瘤细胞内IDO2的表达参与体内肿瘤的生长过程,且能影响其引流淋巴结内肿瘤免疫反应。

• 单位
  江西省医学科学院; 江西科技学院; 基础医学院; 南昌大学免疫与生物治疗研究所