人巨细胞病毒感染对THP-1源性巨噬细胞自噬的影响

作者：马迪; 方峰; 刘玲玲; 黄媛; 舒赛男; 刘兴楼^*

来源：国际病毒学杂志, 2018, 25(06): 399-404.

• 巨细胞病毒
• 巨噬细胞
• 自噬
• THP-1源性巨噬细胞

目的了解人巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)感染THP-1源性巨噬细胞后对细胞自噬的影响。方法构建HCMV感染THP-1源性巨噬细胞模型,分别设HCMV感染组(HCMV组)、热灭活HCMV感染组(Heat-HCMV组)、模拟感染对照组(M组)和雷帕霉素(rapamycin,400 nmol)自噬阳性对照组(RAPA组),病毒感染复数=1。采用western blot检验测量各组自噬相关蛋白Beclin1表达量和LC3转化量(LC3-II/LC3-I)在感染后1 h、3h、6h、12h、24h和48 h的动态变化,并用透射电镜观察感染后6 h、12 h和24 h各组细胞胞质中自噬泡形成的数量。结果在HCMV感染组,HCMV感染THP-1源性巨噬细胞后1 h,自噬相关蛋白Beclin1表达量明显增高,高于模拟感染组。LC3转化量在感染后6 h明显增高,高于模拟感染组。感染后24 h和48 h,Beclin1表达量和LC3转化量都降低,且均低于RAPA阳性对照组。用热灭活HCMV处理THP-1源性巨噬细胞,Beclin1在1h就开始明显高表达,高于模拟感染组。LC3转化量在6h开始明显增高,高于模拟感染组。用透射电镜观察到在HCMV感染THP-1源性巨噬细胞后6 h,自噬泡数目明显增加,但感染后24h明显降低。热灭活HCMV处理THP-1源性巨噬细胞后6h,自噬泡明显增加,并持续到48h。结论HCMV感染THP-1源性巨噬细胞早期可激活细胞自噬,其激活方式可能并不依赖于HCMV复制,而感染后期细胞自噬受到抑制,这可能与HCMV复制等因素有关,但需进一步实验证实。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院