葡萄糖转运蛋白-2逆转录病毒表达载体构建/包装及其鉴定

作者：方芳; 凌贤龙

来源：第三军医大学学报, 2010, (11): 1207-1209.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2010.11.009

• 葡萄糖转运蛋白-2
• 逆转录病毒载体
• PA317细胞
• 包装
• 鉴定 glucose transporter-2
• retroviral vector
• PA317 cell
• packaging
• identification

目的构建葡萄糖转运蛋白-2(glucose transporter-2,GLUT-2)基因逆转录病毒表达载体及其稳定产毒细胞系,为新型"人工胰岛β细胞"的构建奠定基础。方法质粒pCB7/GLUT2经EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切,克隆至逆转录病毒载体PLXSN,构建成重组逆转录病毒表达载体pL-GLUT2-SN,经酶切及测序鉴定;转pL-GLUT2-SN至包装细胞系PA317,G418抗性筛选,检测上清病毒滴度,挑选滴度较高的稳定产毒细胞克隆行PCR及RT-PCR鉴定。结果建立GLUT-2基因逆转录病毒表达载体pL-GLUT2-SN,经酶切及测序证实目的基因插入位点及读码框架正确;所建稳定产毒细...

• 单位
  新桥医院