人脐带间充质干细胞外泌体的分离鉴定及其溶血性能研究

作者:杨玮杰; 李佳曌; 陈良键; 张婧; 刘凯鲁; 张驰; 肖月; 李晶*
来源:南京医科大学学报(自然科学版), 2019, 39(02): 165-170.

摘要

目的:分离并鉴定人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSC)分泌的外泌体,研究其对人血的溶血性能。方法:通过超速离心法从脐带干细胞培养上清中分离外泌体,采用蛋白免疫印迹法、透射电镜和纳米颗粒跟踪分析法进行鉴定;制备人红细胞悬液,加入不同浓度外泌体,进行溶血试验,用试管法观察并用紫外分光光度法测定计算溶血度。结果:分离获得的外泌体特异富集蛋白CD9、CD81、Alix,不含有高尔基体蛋白Gm130;透射电镜下可见其呈杯盘状结构,粒径直径为40~120 nm;脐带干细胞外泌体对人血的溶血率小于5%。结论:HUCMSC分泌的外泌体具有外泌体的经典结构及典型特征,不引起人血溶血反应,为未来脐带干细胞外泌体作为载体进行药物递送提供了实验依据。

  • 单位
    南京医科大学第一附属医院; 南京医科大学; 生殖医学国家重点实验室