灰红链霉菌AL7基因组文库及异源表达文库的构建

作者：刘培; 俞燕飞; 陶美凤

来源：华中农业大学学报, 2012, (05): 547-552.

DOI：10.13300/j.cnki.hnlkxb.2012.05.005

• 灰红链霉菌AL7
• 基因组文库
• 高通量接合转移
• 异源表达
• 甲基化缺陷菌株 Streptomyces griseoruber AL7
• genomic library
• high-throughput conjugation
• heterologous expression
• methylation deficient strains

灰红链霉菌AL7对多种植物病原真菌和细菌都具有明显的抑菌活性。本研究在通用的大肠杆菌克隆宿主基础上,构建获得Dcm甲基化缺陷菌株,再引入接合转移辅助质粒pUZ8002得到菌株LP3。以LP3为宿主构建灰红链霉菌AL7的基因组粘粒文库,平均插入片段大小40kb。用高通量接合转移的方法将文库转到变铅青链霉菌TK24中,得到了异源表达文库,并从表达文库中初筛获得一些表型特异的克隆,如光秃表型、产素提前表型、产孢提前表型等。

• 单位
  生命科学技术学院; 上海交通大学; 农业微生物学国家重点实验室; 华中农业大学; 微生物代谢国家重点实验室