牛结核杆菌MPB70-ESAT-6融合蛋白的原核表达及抗原反应性分析

作者：姜秀云; 董阳; 包艳红; 张建宁; 方诗文; 金海玲; 王宁; 马红霞^*

来源：中国兽药杂志, 2019, 53(03): 7-12.

• 牛结核杆菌
• mpb70基因
• esat-6基因
• 融合蛋白
• 原核表达

为增强单个蛋白的抗原性,利用(Gly4Ser)3柔性连接肽将牛结核杆菌MPB70和ESAT-6融合。采用重叠延伸PCR技术将牛结核杆菌mpb70与esat-6基因连接,获得融合基因mpb70-esat-6,连接至T-Vector pMD19中,获得克隆质粒pMD-70-esat-6。经Bam HⅠ、EcoRⅠ酶切、纯化,并与p ET28a(+)载体连接,构建了pET-70-esat-6重组表达质粒。SDS-PAGE发现,在27.2 ku处表达了融合蛋白MPB70-ESAT-6,Western blotting证实,MPB70-ESAT-6与牛结核阳性血清反应性良好。MPB70-ESAT-6融合蛋白的研究为牛结核病诊断抗原及相关疫苗研究奠定了基础。

• 单位
  生命科学学院; 动物科技学院; 吉林农业大学; 长春科技学院