Livin基因增强骨肉瘤转化和顺铂耐药性的体外实验研究

作者:李旭; 李岩; 程世孝; 李雷明; 孟凡贺; 王立国; 王军; 范广宇
来源:中国医科大学学报, 2013, 42(08): 673-677+696.
DOI:10.3969/j.issn.0258-4646.2013.08.001

摘要

目的探讨凋亡抑制蛋白(IAP)家族新成员Livin基因在骨肉瘤形成以及多药耐药过程中的作用。方法应用亚克隆技术构建Livin基因短发夹RNA(shRNA)表达载体,稳定转染并筛选沉默Livin表达的克隆。细胞克隆形成法测定阳性克隆的非贴附性生长状态。流式细胞计数法测量Livin表达短期沉默后细胞周期和顺铂化疗敏感性的变化,以及长期沉默后的Hoechst33258核染色情况。Western blot检测Cyclin D1、Bcl-2、Bax、活化型Caspase-3和多聚ADP核糖多聚酶的表达变化。结果在骨肉瘤U2-OS细胞中,shRNA介导了Livin mRNA和蛋白水平的下调,细胞克隆形成能...

  • 单位
    中国医科大学附属第一医院

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