非病毒载体介导的人凝血因子Ⅷ基因在小鼠32D细胞系中的表达

作者：尹俊; 王鸿利; 王学锋; 璩斌; 武文漫; 丁秋兰; 傅启华; 戚正武; 王振义

来源：中国实验血液学杂志, 2004, 12(06): 721-725.

DOI：10.3969/j.issn.1009-2137.2004.06.001

• 血友病A
• 非病毒载体
• 人凝血因子Ⅷ
• 基因表达
• 32D细胞系 hemophilia A
• non viral vector
• human coagulation factor Ⅷ
• gene expression
• 32D cell line

为了观察非病毒载体 pRC/RSV介导的人凝血因子Ⅷ基因在小鼠 32D细胞系中的表达 ,将B结构域缺失(△ 76 0aa - 16 39aa)的人FⅧcDNA(hFⅧBDcDNA)亚克隆至质粒载体pRC/RSV ,构建重组质粒载体 pRC/RSV hFⅧBDcDNA。经SuperFectTransfectionReagent转染小鼠 32D细胞系 ,分别采用一期法、ELISA法和RT PCR检测细胞培养上清液中人FⅧ的促凝活性 (hFⅧ∶C)和抗原含量 (hFⅧ∶Ag)以及细胞中hFⅧBDcDNA的转录。结果表明 :小鼠 32D细胞系培养上清液中的人FⅧ∶Ag最高达到了 4 5 0 .0 8毫...

• 单位
  中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所; 上海第二医科大学; 汕头大学医学院; 瑞金医院