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摘要
构建一种快速免提取核酸释放剂并开发与之匹配的微流控芯片，用于RNA类核酸样本检测的前处理。将表面活性剂Surfactin、蔗糖、Triton X-100、Chelex-100、BSA和无酶无菌水配制成核酸释放剂，并在此基础上设计配套的微流控芯片；采用新型冠状病毒假病毒标准品结合下游RT-RPA检测和RT-PCR检测对几种成分的配比及反应条件进行优化，并评价核酸释放剂的灵敏度、稳定性及其在微流控芯片上的效果。本研究所述的核酸释放剂仅需约10 min即可完成核酸样本的释放，处理后的样本RT-RPA检测限可达1 000 copies/mL,RT-PCR检测限可达200 copies/mL；室温放置22天后释放效果未见明显降低；本研究设计的微流控芯片仅需一台简单的离心设备即可运行，主要结构包括样本腔、混匀通道和孵育腔3个部分，配合核酸释放剂使用仍可保持较高的检测灵敏度，处理后的样本RT-PCR检测限为200 copies/mL。本研究所述核酸释放剂稳定性较高，且具有较高的检测灵敏度，与微流控芯片组合使用可实现快速、简便、低成本的核酸检测样本前处理。
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