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摘要
目的 :构建表达肠毒素大肠杆菌 (ETEC)定居因子CS6的重组质粒 ,并在大肠杆菌DH5α中高效表达。方法 :利用基因工程的方法 ,将含有CS6基因的质粒pMG2 33用限制性内切酶ClaⅠ酶切 ,得到长约 3.1kb的CS6片段 (含有CS6结构基因及调控基因的DNA片段 ) ;并与用限制性内切酶ClaⅠ酶切的表达载体质粒pBV32 1连接 ,得到含有CS6片段的重组质粒pMG2 35 ,转化至大肠杆菌DH5α。结果 :SDS PAGE、Western印迹及免疫荧光观察的结果表明 ,重组菌DH5α/pMG2 35可高效表达相对分子质量为 14 6 0 0的CS6抗原蛋白 ,并在重组菌表面表达 ,表达产物可被抗CS6多克隆抗体识别。结论 :重组菌可稳定表达肠毒素大肠杆菌定居因子抗原CS6。
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单位军事医学科学院
