RNA干扰沉默DcR3对人胰腺癌细胞化疗药物敏感性影响的实验研究

作者：肖华平; 谢辉; 罗春阳; 李庆; 方玉江

来源：中国癌症杂志, 2017, 27(11): 873-878.

DOI：10.19401/j.cnki.1007-3639.2017.11.006

• 诱骗受体-3
• RNA干扰
• 胰腺癌
• 凋亡
• 化疗敏感性

背景与目的:大部分胰腺癌具有高表达诱骗受体-3(decoy receptor 3,Dc R3)的特征,而后者与Fas L凋亡途径相关,可能导致胰腺癌对化疗耐药。该研究旨在探讨RNA干扰沉默Dc R3基因对人胰腺癌细胞化疗药物敏感性的影响及其可能机制。方法:构建带有Dc R3-si RNA序列的稳定表达质粒,通过LipofectamineTM2000转染至人胰腺癌细胞As PC-1细胞株,筛选出转染后稳定低表达Dc R3的胰腺癌细胞,同时设未转染对照组(control组)和转染阴性质粒对照组(mock组)。应用ELISA和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测各组As PC-1细胞中Dc R3的蛋白表达;MTT实验检测各组As PC-1细胞对吉西他滨的敏感性;流式细胞术检测各组As PC-1细胞凋亡情况;Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测各组As PC-1细胞中Fas L、Caspase-8、Caspase-3蛋白和m RNA的表达。结果:转染Dc R3-si RNA后As PC-1细胞中Dc R3蛋白较其他对照组明显降低;转染Dc R3-si RNA后As PC-1细胞对吉西他滨的敏感性显著增加;沉默Dc R3基因可以上调Fas L、Caspase-8和Caspase-3的表达并促进吉西他滨诱导的细胞凋亡。结论:RNA干扰沉默Dc R3基因可激活Fas L/Caspase凋亡途径,促进肿瘤细胞凋亡,增加人胰腺癌As PC-1细胞对化疗药物的敏感性。

• 单位
  湘南学院附属医院