沉默PGRN基因对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

作者：宋立先; 刘春红; 高蓉; 刘思言; 徐学振^*

来源：中国免疫学杂志, 2023, 39(05): 951-955.

• PGRN
• 类风湿关节炎滑膜成纤维细胞
• 增殖
• 凋亡

目的：探讨沉默颗粒蛋白前体（PGRN）基因对类风湿关节炎（RA）滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其相关机制。方法：按照脂质体法将siRNA PGRN、siRNA NC转染至RA滑膜成纤维细胞MH7A，记为siRNA NC组、siRNA PGRN组，对照组（Control）未进行转染处理；将siRNA PGRN转染RA滑膜成纤维细胞MH7A后，加入丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路激活剂Anisomycin，记为siRNA PGRN+Anisomycin组。采用qRT-PCR检测各组细胞PGRN mRNA表达水平；噻唑蓝（MTT）、克隆形成实验检测各组细胞增殖能力；流式细胞术检测各组细胞凋亡变化；Western blot检测各组细胞PGRN、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原（PCNA）、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)蛋白、MAPK通路蛋白表达。结果：与Control组、siRNA NC组相比，siRNA PGRN组内PGRN mRNA及蛋白表达、克隆形成率、存活率明显降低，凋亡率明显升高，Cyclin D1、PCNA、Bcl-2、p-p38 MAPK蛋白表达降低，Bax蛋白表达增加。与siRNA PGRN组相比，siRNA PGRN+Anisomycin组内p-p38 MAPK、Cyclin D1、PCNA、Bcl-2蛋白表达增加，克隆形成率、存活率明显增加，Bax蛋白表达、凋亡率明显降低。结论：沉默PGRN能抑制RA滑膜成纤维细胞增殖并诱导其凋亡，其作用机制可能与MAPK信号通路有关。

• 单位
  滨州医学院