HBx、MHBs~(t155)真核表达载体构建及在HepG2细胞中的表达

作者：康艳红; 杨林; 麦丽; 张绍全; 胡朝霞; 谢奇峰; 高志良

来源：热带医学杂志, 2012, (05): 501-505+509+639.

• HBx
• MHBst155
• GFP
• 细胞株
• 基因表达 HBx
• MHBst155
• GFP
• cell line
• gene expression

目的建立稳定、高效的HBx、羧基末端截短的中分子表面蛋白(MHBst)体外表达细胞株,以进一步研究HBx、MHBst蛋白在肝癌发生中的作用及其机理。方法设计特异性引物,采用PCR方法从adr亚型HBV质粒pHBV DNA中扩增HBx、羧基末端截短至155位氨基酸的中分子表面蛋白(MHBst155)编码基因,并定向插入绿色荧光蛋白(GFP)表达载体pEGFP-C1的BglⅡ、KpnⅠ和BglⅡ、BamHⅠ酶切位点,转化宿主菌DH5α,提取质粒,分别用上述内切酶酶切及DNA测序鉴定重组质粒。采用脂质体介导将空载体、重组质粒分别转染到人肝肿瘤细胞株HepG2中,G418筛选抗性细胞克隆,荧光显微镜下...

• 单位
  中山大学附属第三医院