鸡Ⅱ型星状病毒绝对定量real-time PCR的建立及应用

作者：赵伟; 武宗仪; 秦爱建; 钱琨^*

来源：中国家禽, 2020, 42(12): 30-35.

DOI：10.16372/j.issn.1004-6364.2020.12.006

• 鸡Ⅱ型星状病毒
• RdRp基因
• 绝对定量
• real-time PCR

研究旨在建立一种检测鸡Ⅱ型星状病毒(CAstV)绝对定量的检测方法。采用PCR方法扩增Ⅱ型CAstV保守区域基因RdRp部分基因,将其克隆至pGEM-T载体作为阳性标准质粒,并根据获得的RdRp基因设计合成一对133 bp引物,成功建立了Ⅱ型CAstV的绝对定量real-time PCR的检测方法。结果显示:研究构建的检测方法线性关系良好,检测灵敏度为10copies/μL,且对常见的禽源病毒均无非特异性扩增,特异性好。应用建立的绝对定量real-time PCR检测了病毒感染1日龄雏鸡不同组织样品,掌握了鸡Ⅱ型星状病毒在鸡体内不同组织内的分布及增殖情况。试验成功建立了Ⅱ型CAstV绝对定量real-time PCR检测方法,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为进一步深入研究Ⅱ型CAstV的生物学特性提供了检测手段。

• 单位
  扬州大学