褪黑素对小鼠软骨细胞系ATDC5活性的影响

作者：孙锦鹏; 刘军; 白云峰; 华峰; 王浩然; 郑宏瑞; 吴涛^*

来源：中国组织工程研究, 2022, 26(35): 5665-5668.

• 青少年
• 特发性脊柱侧凸畸形
• 褪黑素
• 软骨细胞活性
• 褪黑素受体基因
• AMPK
• ATDC5细胞

背景:目前在青少年特发性脊柱侧凸的研究中,主要使用从青少年髂软骨中提取的人原代软骨细胞,然而由于家长顾虑及伦理限制等原因,极大限制了青少年特发性脊柱侧凸的研究。因此,寻找一种可以代替人原代软骨细胞进行青少年特发性脊柱侧凸研究的细胞具有重大科研和社会意义。目的:观察小鼠软骨细胞系ATDC5在褪黑素刺激下的活性、受体及信号通路蛋白的改变,探究是否可以使用ATDC5细胞代替人软骨细胞。方法:将ATDC5细胞接种于96孔板中,给予不同浓度(10-5,10-6,10-7,10-8,10-9,10-10,10-11,10-12 mol/L)的褪黑素刺激,以不给予褪黑素刺激的细胞为对照,培养72 h后,采用MTT法检测ATDC5细胞增殖率。将ATDC5细胞接种于96孔板中,对照组不给予褪黑素刺激,实验组给予10-5 mol/L的褪黑素刺激,培养24 h后,采用免疫印迹法检测褪黑素受体及AMPK通路的蛋白表达。结果与结论:①随着褪黑素刺激浓度的增加,ATDC5细胞增殖率升高;②实验组Ⅱ型胶原、p-AMPK、褪黑素受体基因1B的蛋白表达高于对照组(P<0.05),两组AMPK、褪黑素受体基因1A的蛋白表达比较差异无显著性意义(P> 0.05);③结果表明,褪黑素可促进小鼠软骨细胞系ATDC5增殖,其增殖率与文献报道的相同浓度褪黑素刺激人软骨细胞类似,提示存在使用小鼠软骨细胞系ATDC5代替人软骨细胞进行研究的可能性。

• 单位
  南京医科大学第二附属医院