构建疼痛基因腺病毒载体感染体外培养的大鼠神经干细胞

作者：杨辉; 田玉科; 王鹏; 安珂; 高峰

来源：中国临床康复, 2005, 9(17): 43-45.

DOI：10.3321/j.issn:1673-8225.2005.17.030

• 干细胞
• 脑啡肽
• 大鼠

目的:探讨疼痛基因-人前脑啡肽原基因重组腺相关病毒目的基因导入神经干细胞的能力和其功能表达。方法:实验于2004-03/09在华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学实验室完成。①用带有报告基因增强型绿色荧光蛋白的重组腺相关病毒/增强型绿色荧光蛋白转染体外培养的神经干细胞,观察其对神经干细胞的感染能力及持续时间,并用血清诱导被感染干细胞分化,观察细胞分化对外源基因表达的影响。②运用重组腺相关病毒/人前脑啡肽原将人前脑啡肽原基因导入神经干细胞,采用反转录聚合酶链反应、免疫组织化学及放射免疫法检测人前脑啡肽原在神经干细胞中的表达及功能实现。结果:①增强型绿色荧光蛋白转染神经干细胞后2d即发出强烈荧光,5d出现荧光表达高峰,能持续2个月以上;干细胞分化不会影响增强型绿色荧光蛋白的表达。②转染重组腺相关病毒/人前脑啡肽原1周后,干细胞人前脑啡肽原的表达量及其表达产物亮脑啡肽均明显高于未转染细胞犤(286.98±23.44),(304.25±21.73),(97.34±15.68)ng/L,P<0.01犦。结论:重组腺相关病毒能将目的基因整合到神经干细胞并持续而稳定表达,这种特性可使其能成为基因治疗疼痛的重要工具和新的途径。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院