摘要
目的 探讨ZNF384通过调控GCLM对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)增殖和转移的影响及具体调控机制。方法 分别在HCC细胞系HepG2和HuH7中转染si-ZNF384和pcDNA-GCLM。Western blot检测ZNF384和GCLM蛋白表达以及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)标志物Ncadherin、Vimentin、E-cadherin的表达,CCK-8检测细胞增殖活力,Transwell检测细胞迁移。双荧光素酶报告基因实验验证ZNF384和GCLM结合关系。荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术检测ZNF384和GCLM在HepG2细胞中的定位。结果 ZNF384和GCLM在HepG2和HuH7细胞中表达升高(P <0.05),敲降ZNF384抑制HepG2和HuH7细胞增殖(P <0.001)、迁移(P <0.001)以及间质标志物N-cadherin(P <0.01)和Vimentin(P <0.01)的表达,促进上皮标志物E-cadherin的表达(P <0.01)。数据库以及双荧光素酶实验证实ZNF384与GCLM启动子结合。过表达GCLM逆转敲降ZNF384对HepG2和HuH7细胞增殖、迁移以及EMT的抑制作用(P <0.05)。结论 敲降ZNF384通过抑制GCLM,抑制HCC细胞增殖和转移。
-
单位青岛市市南区人民医院; 青岛市第三人民医院