食品检测用产肠毒素大肠埃希氏菌标准物质的制备及评价

作者：刘娜; 王亚萍; 赵琳娜; 王学硕; 崔生辉^*

来源：中国食品卫生杂志, 2022, 34(02): 270-274.

DOI：10.13590/j.cjfh.2022.02.012

• 微生物标准物质
• 产肠毒素大肠埃希氏菌
• 均匀性
• 稳定性
• 应用

目的 制备并评价产肠毒素大肠埃希氏菌（ETEC）标准物质。方法 分别用基质辅助激光解吸电离（MALDI-TOF MS）、生化、16 s RNA基因序列测定三种方法确认菌株种属。采用冷冻干燥技术制备600个ETEC标准样品（103CFU/样品）；从中随机抽取20个进行均匀性检验；模拟25℃和37℃的运输温度测试样品的运输稳定性，同时在4℃和-20℃的条件下进行保藏稳定性检验。组织3家实验室对样品进行协同验证。最后选择20件食品基质来验证样品的使用效果。结果 生化、MALDI-TOF MS、16 s RNA基因序列鉴定CMCC(B)43208为大肠埃希氏菌，lt、stp、sth基因确认其为ETEC。均匀性检验中，单因素方差分析得F=1.48，小于FINV(0.05,19,20)。稳定性检验中，在25℃和37℃保藏7 d后结果为103CFU/样品，在-20℃保藏60 d和4℃保存28 d后结果为103CFU/样品。协同标定实验中，3家实验室检测样品中菌株均为ETEC(103CFU/标准样品)。使用效果评价中，ETEC标准样品加入20种食品基质后均可检出，而本底对照均未检出。结论 本实验制备的ETEC标准样品均匀且稳定，协同验证、食品基质验证实验结果均与预期设置的103CFU/样品一致，可以作为标准物质使用。

• 单位
  中国食品药品检定研究院