科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
背景：干细胞来源胰岛β细胞移植被认为是治疗1型糖尿病的有效手段。人脐带间充质干细胞是理想的细胞来源，但其向胰岛β细胞分化的效率不高。目的：研究MAFA、PDX1修饰促进人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的潜能。方法：构建MAFA-PDX1过表达慢病毒载体，用细胞形态学、RT-qPCR法、双硫腙染色比较3种方案[方案A：单纯慢病毒组；方案B：先药物(尼克酰胺、β-巯基乙醇)诱导再加慢病毒组；方案C：慢病毒和药物诱导同时进行组]诱导人脐带间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞的效率和潜能。结果与结论：(1)细胞形态学改变：经3种方案诱导后细胞形态均发生了改变，方案B在诱导第11天细胞聚集生长最为明显，出现聚集生长的胰岛样细胞团；(2) RT-qPCR检测胰岛相关基因的表达差异：同一诱导时间点3种方案横向比较，在诱导第5天，方案C的MAFA和PDX1基因表达量最高，方案B的GCG基因表达量最高；在诱导第11天，方案B的MAFA、PDX1基因表达量以及INS和GLUT2基因表达量最高；(3)双硫腙染色鉴定锌离子：3种方案诱导第11天部分细胞被双硫腙染成棕红色，其中方案B中部分小岛状细胞被染成棕红色，颜色较深(阳性表达)；(4)结果表明，MAFA和PDX1共过表达可促进人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化；MAFA-PDX1基因修饰联合药物诱导方案优于单纯基因修饰方案。
- 单位
